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派致生物与您分享基因敲除的另类方法

作者:admin | 发布日期:2019-06-12 09:10

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        派致生物专注于基因编辑技术和基因疗法的开发与应用。今天派致生物就跟您分享分享基因敲除的另类方法。
 

 
        基因敲除技术是20世纪80年代末发展起来的一种分子生物学技术。它是一种通过某种方式导致体内特定基因突变或缺失的技术。通过观察基因缺失引起的表型变化,可以推断该基因的生物学功能。
        早期基因敲除主要利用DNA同源重组原理设计同源片段来替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。
        目前最成功的敲除技术有锌指敲除技术、TALEN敲除技术和CRISPR/Cas9敲除技术。
        常规的基因敲除包括用Neo盒靶向基因,以取代被敲除基因的几个重要外显子或功能区域。该基因产物并非在所有这些小鼠的组织和细胞中都表达。这种基因敲除小鼠一般用于研究基因对小鼠全身生理和病理方面的影响,而该基因对胚胎并不致命。
       另一种基因敲除方法:
       ZFN技术用于敲除小鼠
       ZFN能够识别和结合特定的基因序列位点,并高效、精确地切断它们。细胞利用DNA修复的自然过程插入、删除和修改DNA,使研究人员可以随意编辑基因组。这在过去是不可想象的。
       传统的基因敲除技术依赖于细胞内自然发生的同源重组,而这种重组的效率只有百万分之一。利用这些技术对小鼠基因进行位点特异性敲除和敲除可以将时间从一年缩短到几个月。
特定于设计的ZFN是该技术最关键的部分。
       目前,研究人员使用计算生物学的方法来设计高度特异性的ZFN,但是ZFN的脱靶问题,或者在不应该被切割的地方切割,仍然是一个挑战。因此,用ZFN技术对小鼠进行基因修饰不能完全取代传统技术。

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